Для качественной диагностики многих онкологических заболеваний необходим иммуногистохимический анализ. Иммуногистохимический анализ – это микроскопическое исследование тканей. Во время анализа срезы обрабатываются антителами, маркированными к выявляемому веществу.
Метод высокоточный и информативный, позволяющий не только обнаружить новообразование, но и разработать оптимальную лечебную тактику.
Химиотерапия назначается при онкологии лимфатической системы, если больны лимфоузлы или внутренние органы.
ИГХ исследования – что это такое
Методика ИГХ применяется в патологической анатомии для диагностики злокачественных и доброкачественных опухолей. Ее используют, когда точный диагноз по стандартным гистологическим методам затруднителен или требуется детальное изучение клинически важных параметров опухоли на молекулярном уровне.
Часто гистологии оказываются недостаточными. В большинстве случаев причина в крайне нетипичной структуре патологического образования, что существенно затрудняет постановку точного диагноза. При лимфоме и лейкозе ИГХ выполняют практически всегда.
Существует примерно семьдесят видов лейкозов и лимфом. Некоторые из них можно установить только после проведения ряда исследований: гистологического, иммуногистохимического и молекулярно-генетического.
Диагноз «мелкокруглоклеточная опухоль» может соответствовать 13 злокачественным образованиям с разным течением и прогнозом. Каждое из этих образований нуждается в разработке индивидуальной схемы химио- и радиотерапии. Метод иммуногистохимия помогает дифференцировать подобные опухоли.
Суть методики
При развитии опухолевого процесса организм вырабатывает чужеродные белки – антигены. Иммунная система человека в ответ вырабатывает антитела – иммуноглобулины. Антитела прикрепляются к антигенам и связываются с эпитопами – основными частями антигенных макромолекул. Антитела выполняют две функции: связывающую и эффекторную. Антитела напрямую мешают антигенам наносить вред и активируют комплемент, запуская ответную реакцию иммунитета.
Атипичные опухолевые клетки в данном случае выступают в роли антигенов. Перед иммуногистохимическим исследованием срезы биоматериала маркируются специфическими антителами к ним. Для последующей визуализации эти антитела окрашиваются ферментами. Затем, при помощи высокоточной оптики, наблюдают за поведением исследуемых клеток.
При связывании белковых соединений,标记рованных как антитела, с опухолевыми клетками возникает свечение – флюоресценция, указывающая на наличие искомых веществ. Так определяют, например, рецепторы к гормонам и онкомаркеры. При подозрении на рак молочной железы таким методом обнаруживают рецепторы к эстрогену и прогестерону.
Кому показано
Иммуногистохимия применяется для выявления злокачественных новообразований. В онкологии метод используется для поиска метастазов и патологических микроорганизмов, определения вида и локализации опухоли, а также для оценки активности патологического процесса.
С помощью ИГХ возможно установление окончательного или промежуточного диагноза при меланоме, саркоме, лимфогранулематозе, лимфолейкозе и лейкозе. Метод позволяет типировать степень злокачественности процесса, что важно для нейроэндокринных образований, называемых «скрытыми убийцами» из-за трудности распознавания на ранних стадиях.
Иммуногистохимический анализ помогает избежать назначения слишком сильного и опасного для организма лечения.
Иногда иммуногистохимический анализ помогает определить место возникновения метастазов при неизвестном первичном очаге и проводить дифференциальную диагностику нескольких опухолей разного типа.
ИГХ может быть назначена при бесплодии, хронических патологиях эндометрия, матки и яичников, привычных выкидышах. Ее можно проводить также тогда, когда беременность не наступает после нескольких попыток ЭКО.
С помощью иммуногистохимии можно выявить клетки, мешающие зачатию, и спланировать лечение бесплодия.
Методом ИГХ определяют лекарственную чувствительность путём выявления:
- Рецепторы половых гормонов — эстрогена, прогестерона и андрогенов требуются при поражении женской репродуктивной системы.
- Фактор роста опухоли HER2/neu. БИОмаркер и терапевтическая мишень агрессивных форм рака молочной железы.
- Рецепторы соматостатина 2а и 5 типа имеют значение при карциноидах.
- Экспрессия мембранного белка иммуноглобулинов PD-L1, ген ALK и рецептор тирозинкиназы ROS изучаются в основном при диагностике немелкоклеточного рака легких.
- микросателлитной нестабильности;
- индекса пролиферативной активности.
Важность микросателлитной нестабильности (MSI) в патологии ЖКТ трудно переоценить. Эта характеристика существенно расширяет прогностические и лечебные возможности пациентов с онкологическими заболеваниями. Новообразования с низкой MSI растут медленнее и реже дают метастазы.
Как проводятся ИГХ исследования
Для проведения ИГХ требуется биоматериал, обычно полученный путем биопсии. Реже материал берётся во время эндоскопической или открытой операции. Способ забора ткани определяется типом и местоположением опухоли. Важно помнить: материал для анализа нужно брать до начала лечения, иначе результаты исследования могут быть искажены.
Этапы проведения анализа:
- Заполученные образцы фиксируют обработкой формалином перед отправкой в лабораторию.
- После этого его очищают от жира и снова фиксируют, а затем заливают парафином.
- Из заготовленных парафиновых блоков получают тонкими срезами, размещаемые на стеклах. Толщина срезов не превышает 1 микрометр.
Чтобы получить материал для исследования, выполняют биопсию опухоли или удаляют фрагмент ткани во время операции.
Когда ткани располагают на стеклах, их обрабатывают маркированными специфическими антителами к выявляемому веществу, выступающему в данной ситуации антигеном. Видов этих антител ограничено несколькими десятками. Исследование реакций с использованием до 5 разных антител проводится на малой панели. При более обширном эксперименте требуется большая панель.
Финальным этапом анализа выступает иммуногистохимический метод, использующий микроскопию для изучения тканей.
Во время ИГХ опухоль любого органа светится – флуоресцирует – вследствие чего обнаруживаются злокачественные клетки, устанавливаются рецепторы гормонов или другие заданные характеристики.
Расшифровка
Врачи-патологоанатомы изучают срезы биоматериала и составляют прогноз на основе типа и объема онкогенных клеток. При расшифровке результатов особое внимание уделяют показателю К-67 – специфическому белку, антигену ракового процесса. К-67 вырабатывается только при активном делении клеток и не продуцируется в состоянии покоя.
К-67 указывает на тяжесть онкологического процесса. Уровень этого маркера в 85% и более свидетельствует о быстром прогрессе заболевания и высоком риске летального исхода.
Прогноз благоприятен при К-67=10%. С хорошо продуманным планом лечения есть все шансы на полное выздоровление, зачастую без риска рецидива. При К=30% болезнь оценивают как средней тяжести, что означает достаточно быстрый рост рака. С помощью курсовой химиотерапии его можно замедлить и даже остановить.
В медицинском заключении указываются не только показатели К-67, но и типы антител с соответствующими антигенами, а также их количество.
Заключение врача-патологоанатома передается лечащему онкологу для подбора лечения. После завершения терапии эффективность лечения оценивается повторной иммуногистохимией.
Видео
Читайте далее: ПГД эмбриона
Фото: Depositphotos